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      • 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇經(jīng)驗操作流程

        2017-10-11 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇經(jīng)驗總結(jié)2016/11/29閱讀(53)細(xì)胞凍存過程對保持細(xì)胞狀態(tài)影響巨大,李記生物結(jié)合多年實踐,總結(jié)出如下實用的細(xì)胞凍存流程?!奥齼隹烊凇笔羌?xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則,這對zui大限度的保存細(xì)胞活力至關(guān)重要。目前細(xì)胞凍存多用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作為保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性;細(xì)胞凍存和復(fù)蘇時,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶產(chǎn)生是關(guān)鍵。緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少冰晶對細(xì)胞的物理損傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證...
      • 溶酶體染色試劑盒的功能研究

        2017-09-22 溶酶體染色試劑盒液的配制,六孔板每孔所需JC-1染色工作液的量為1mL,其他培養(yǎng)器皿的JC-1染色工作液的用量以此類推,對于細(xì)胞懸液每50~100萬細(xì)胞需0.5mLJC-1染色工作液。取適量JC-1(200×),按照每50μLJC-1(200×)加入8mL超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2mLJC-1染色緩沖液(5×),混勻后即為JC-1染色工作液.溶酶體染色試劑盒發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分...
      • DNA定量試劑盒的應(yīng)用細(xì)節(jié)

        2017-09-06 DNA定量試劑盒靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好。操作簡便,省時省力。水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞。無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低。為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。適合于高通量藥物篩選。DNA定量試劑盒樣本涵蓋,福爾馬林固定組織樣本(FFPE),其DNA損壞程度較重,激光顯微切割捕獲的樣本;提取自流式細(xì)胞的DNA;血漿或血清中的游離DNA;其他微量或非常珍貴的臨床樣本。DNA定量試劑盒系統(tǒng)檢測,標(biāo)準(zhǔn)曲線測定1次即可,如果儀器更換,則需要重新測定1次。如果熒光讀...
      • 溶酶體染色試劑盒的整體優(yōu)勢

        2017-08-18 溶酶體染色試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細(xì)菌活性的比色檢測產(chǎn)品。本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細(xì)菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與細(xì)菌的活性成正比。細(xì)菌活性越強(qiáng),則顏色越深;細(xì)菌活性越弱,則顏色越淺。溶酶體染色試劑盒適用于從各類蛋白樣品中純化膜蛋白,包括動物、植物、細(xì)菌、真菌、酵母等蛋白粗樣品,純化過程簡單方便,可在1小...
      • 溶酶體染色試劑盒的應(yīng)用特點

        2017-08-03 溶酶體染色試劑盒對于懸浮細(xì)胞,取10~60萬細(xì)胞,重懸于0.5mL細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅加入0.5mLJC-1染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。在孵育期間,按照每1mLJC-1染色緩沖液(5×)加入4mL蒸餾水的比例,配制適量的JC-1染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。37℃孵育結(jié)束后,600g4℃離心3~4分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具,用來標(biāo)記亞細(xì)胞,細(xì)胞器;例如細(xì)胞膜、溶酶體、...
      • 無毒、安全的核酸染料——李記GelRed

        2017-07-20 GelRed是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有*設(shè)計的熒光染料。在游離狀態(tài)下,GelRed發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強(qiáng)。因此,GelRed的熒光信號強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān),可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。GelRed與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置。標(biāo)準(zhǔn)的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在300nm紫外光附近可得到*激發(fā)。GelRed的zui大吸收...
      • DNA定量試劑盒的檢測規(guī)程

        2017-07-04 DNA定量試劑盒結(jié)果判斷,如果Ct值=40,則實驗樣品的UUDNA含量(基因拷貝數(shù)/ml)<1×103。如果Ct值<40,則實驗樣品的UUDNA含量(基因拷貝數(shù)/ml)=M。檢測樣本中核酸陽性時,按實際結(jié)果報告;對可疑結(jié)果應(yīng)復(fù)查,需要時與臨床。注意事項,各標(biāo)本沸水浴時間誤差不超過1分鐘。加樣時每加完一個要立即蓋上封閉好離心管。DNA定量試劑盒操作時,須戴手套。使用新鮮配制的染色工作液,務(wù)必不要超過2小時,且注意避光。建議使用塑料管配制染色工作液,而不是玻璃制品。孵育時,避免光...
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