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如何選擇核酸染料
2022-05-27 科研人員還在為如何選擇核酸染料而煩惱嗎？帶您認識幾款優(yōu)秀的核酸染料一、李記GelRed,李記GelGreen——李記生物研發(fā)的兩款核酸染料。據(jù)不*統(tǒng)計，有強烈致癌、致畸作用的EB染料仍以90%的優(yōu)勢占據(jù)核酸染料使用量多，在眾多的EB替代染料中，名氣最大的要數(shù)Life公司的SYBR系列、美國Biotium公司的GelRed,GelReen染料，其他替代染料要么是EB,吖啶橙改名，要么是國內(nèi)不成熟的仿品，安全性毫無保障。Life公司的SYBRGreen,SYBRGoad,SYBR...
細胞增殖及細胞活力檢測方法
2022-05-25 一、細胞增殖與細胞活性細胞增殖是活細胞的重要?理功能之?，細胞增殖與細胞活性檢測所用的方法相近，但實驗?zāi)康牟煌?。細胞增殖是通過細胞增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)判斷細胞的數(shù)量變化，例如細胞計數(shù)法，反應(yīng)的就是細胞真實的數(shù)量。而細胞活性檢測，則是通過檢測細胞受到藥物或其他措施處理后，標志物產(chǎn)量或濃度的變化，進而判斷藥物或處理措施的作用，細胞活性檢測所得結(jié)論，往往反映了實驗設(shè)計的目的。細胞增殖檢測，因檢測標志物的不同，目前大致分為四類：DNA合成檢測、代謝活性檢測、細胞增殖相關(guān)抗原檢測和ATP濃度...
蛋白保存方法，你知道多少
2022-05-24 生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用，但更多情況是協(xié)同作用。總的來說，蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護、避免輔助因子喪失等，以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大，故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存(1).在低溫下保存蛋白質(zhì)對熱敏感，溫度越高，穩(wěn)定性越差。因此，低溫保存蛋...
牛血清白蛋白BSA在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用
2022-04-26 牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術(shù)得到5種組份，其中第五種就是白蛋白），CAS號為9048-46-8，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用，無免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產(chǎn)品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用...
介紹重組腸激酶的使用注意事項
2022-04-24 重組腸激酶（Enterokinase,lightchain）是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐让?，也可以將帶有這個識別序列的融合蛋白切開。由于腸激酶具有高度專一性，水解效率高的特點，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。腸激酶具有高度專一性，水解效率高的特點，它被廣泛地應(yīng)...
細胞凍存液分類與選擇
2022-04-24 細胞凍存是細胞生物學(xué)研究及藥物研發(fā)細胞實驗中需要經(jīng)常面對的常規(guī)操作。隨著細胞越來越嬌，人工越來越貴，各種細胞凍存液應(yīng)運而生，如何從名目繁多的細胞凍存液中選擇變成一個問題。本文從細胞凍存液分類，應(yīng)用場景，使用效果等多方面加以闡釋，希望能對如何選擇細胞凍存液有所助益。一、細胞凍存液的分類從成分劃分（1）滲透性和非滲透性滲透性保護劑分子量小可滲透到細胞內(nèi)，如甘油、DMSO、乙二醇等，其在細胞冷凍存*凝固之前，滲入細胞內(nèi)，降低細胞內(nèi)外溶液中的電解質(zhì)濃度，阻止細胞內(nèi)水分外滲，避免細胞過...
細胞凍存液原理及配制方法
2022-04-22 細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細胞建株和建系中，及時凍...
PEI轉(zhuǎn)染試劑是非常有潛力的非病毒質(zhì)粒載體試劑
2022-03-28 分子生物學(xué)的發(fā)展使得大量致病基因被鑒定，科學(xué)家在這些研究成果的基礎(chǔ)上發(fā)展了基因治療?；蛑委熓抢没蜉d體將治療基因?qū)牖颊唧w內(nèi)，進而表達功能蛋白以達到治療的目的。基因治療傳遞DNA面臨的挑戰(zhàn)之一是外源治療基因會被體液和胞外空間的核酸內(nèi)切酶降解。治療基因在目標組織中的選擇性積累、細胞內(nèi)化以及從溶酶體逃逸這些問題對所有核酸治療劑都是需要克服的。DNA必須輸送至細胞核以允許獲得轉(zhuǎn)錄和表達。因此，設(shè)計和制備安全高效的基因載體來壓縮并且保護治療基因以免被核酸內(nèi)切酶降解并延長其在體內(nèi)的...

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