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干貨分享 | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇避坑指南
2025-01-08 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，直接影響細(xì)胞存活率和活力，關(guān)系到后續(xù)細(xì)胞實驗?zāi)芊癜凑沼媱澯行У剡M(jìn)行。要想做好細(xì)胞凍存和復(fù)蘇，首先請牢記下面這四個字：慢凍快融！1、為什么要慢凍快融？凍存細(xì)胞時，細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中的水會形成冰晶。如果直接將細(xì)胞凍存到-196℃的液氮中，由于凍結(jié)過程中胞外溶液中的水先結(jié)冰，使胞外溶液不斷濃縮，引起細(xì)胞電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水及蛋白質(zhì)變性等，會導(dǎo)致細(xì)胞受到機(jī)械性損傷。2、細(xì)胞凍存-讓你細(xì)胞安心沉睡3、細(xì)胞復(fù)蘇-讓細(xì)胞滿血復(fù)活■細(xì)胞拿取盡量減少樣...
CFDA, SE 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針檢測原理與注意事項
2025-01-08 CFDA-SE可用于細(xì)胞示蹤，也可用于細(xì)胞增殖檢測。經(jīng)CFDA-SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA-SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測。檢測原理CFDASE可以通過完好的細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶催化分解成CFSE。CFSE可以隨機(jī)地、不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的賴氨酸殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并標(biāo)記這些蛋白，CFDA-SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光。CFDA-SE標(biāo)記的分裂細(xì)...
細(xì)胞培養(yǎng)中碰到真菌污染怎么辦（真菌污染如何預(yù)防）
2024-12-26 真菌污染也是細(xì)胞培養(yǎng)過程中最常見的一種污染。真菌污染一般情況下對其周圍局部細(xì)胞影響較大，而其他地方的細(xì)胞則正常生長。另外由于真菌可以通過孢子繁殖，因此一旦污染很容易發(fā)生擴(kuò)散。?真菌污染主要種類：煙曲霉菌、黑曲霉菌、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌污染等（如圖）其特點如下：①一般來說，培養(yǎng)液不會變渾濁；②比較容易發(fā)現(xiàn)，肉眼可見點狀菌落（淡黃色或者白色）漂浮在培養(yǎng)基表面；③普通倒置顯微鏡下觀察，可見絮狀交錯的菌絲或菌團(tuán)生長在細(xì)胞之間；有時真菌并不是直接分布于細(xì)胞貼壁層，需要通過調(diào)整顯微...
去外泌體胎牛血清作用（無外泌體血清的價格）
2024-12-26 胎牛血清以其能為細(xì)胞生長提供重要的營養(yǎng)及生長物質(zhì)，而成為細(xì)胞培養(yǎng)基中不可少的成分。但是普通胎牛血清中因含有大量的牛源外泌體，會對體外培養(yǎng)的組織或細(xì)胞分泌的外泌體研究造成干擾，影響科學(xué)實驗結(jié)果。而和元李記自主研發(fā)的無外泌體胎牛血清，以特級胎牛血清為原料，經(jīng)過100,000g、4℃、10h的超速離心處理，隨后進(jìn)行無菌過濾，以去除的內(nèi)源性外泌體。這種優(yōu)化處理有效減少了研究中外源性背景信號的干擾，適合用于細(xì)胞培養(yǎng)中的外泌體分離實驗或相關(guān)研究。去外泌體胎牛血清作用?減少外源性背景信號干...
ROS活性氧試劑盒檢測細(xì)胞氧化應(yīng)激的得力助手
2024-12-23 ROS活性氧試劑盒，作為一種重要的生物化學(xué)檢測工具，被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)等多個領(lǐng)域。主要用于檢測細(xì)胞、組織或生物液體中的活性氧(ROS)水平，幫助研究人員了解氧化應(yīng)激對細(xì)胞和組織的影響，從而揭示ROS與疾病發(fā)生和發(fā)展的關(guān)聯(lián)。一、ROS活性氧試劑盒的原理ROS活性氧試劑盒通常利用熒光探針H2DCFDA進(jìn)行檢測。H2DCFDA本身沒有熒光，但可以自由穿過細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，因此很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活...
黑膠蟲去除試劑盒的使用方法
2024-12-20 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，黑膠蟲污染是一個常見且棘手的問題。這些微小的污染物在顯微鏡下呈現(xiàn)為小黑點，有時呈點狀，有時呈小的片狀，運動形式為在原地振動(類似布朗運動)，對細(xì)胞的生長和實驗結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重影響。為了有效清除這些污染物，科學(xué)家們研發(fā)了黑膠蟲去除試劑盒，為細(xì)胞培養(yǎng)提供了有力的支持。一、黑膠蟲去除試劑盒的基本組成黑膠蟲去除試劑盒通常包含一種或多種針對黑膠蟲的高效清除試劑。這些試劑的主要成分為抗菌素或其他具有殺菌作用的化合物，它們能夠特異性地作用于黑膠蟲，而不影響細(xì)胞的正常生長。此外...
實驗干貨｜蛋白質(zhì)濃度測定之BCA法的技巧
2024-12-20 BCA法是Lowry法的一種改進(jìn)方法。與Lowery法相比，BCA法操作起來更加簡單方便，其試劑及其形成的顏色絡(luò)合物穩(wěn)定性更好，幾乎不受其他干擾物的影響，并且靈敏度高（微量檢測可達(dá)到0.5ug/ml），應(yīng)用起來更加靈活。BCA法與Bradford法相比，BCA法的顯著優(yōu)點是不受去垢劑（SDS，TritonX-100，Tween-20等）的影響。BCA法實驗的原理BCA是一種穩(wěn)定的堿性水溶性復(fù)合物。在堿性條件下，蛋白質(zhì)將Cu2+還原為Cu+，Cu+與BCAReagentA（含有...
PVDF膜0.22和0.45的有什么區(qū)別（PVDF膜注意事項）
2024-12-13 PVDF膜（聚偏氟乙烯膜）在WesternBlot實驗中廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印，但其本質(zhì)是一種具有疏水性的聚合物，需要在使用前進(jìn)行預(yù)處理活化，使其在水性緩沖液中更易使用。PVDF膜具有不同的孔徑大小，這些不同之處會影響其在過濾和分離應(yīng)用中的性能和適用性。PVDF孔徑大小不同?0.22μm的PVDF膜適用于截留較小的分子，如小于20kD的蛋白質(zhì)分子。這種膜的孔徑較小，能夠有效地過濾掉較小的顆粒物和細(xì)菌。?0.45μm的PVDF膜則適用于較大分子的蛋白和核酸，以及大于20kD的蛋白...

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