選擇真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑要考慮哪些因素

　　轉(zhuǎn)染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導(dǎo)入細(xì)胞的過程。采用各種化學(xué)、生物學(xué)或物理方法導(dǎo)入外源性核酸會改變細(xì)胞的特性,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞基因功能和蛋白質(zhì)表達(dá)研究。轉(zhuǎn)染后,導(dǎo)入的核酸可以瞬時(shí)性地存在于細(xì)胞內(nèi),只表達(dá)一段時(shí)間且不會復(fù)制,也可以穩(wěn)定地整合至受體基因組內(nèi),隨著宿主基因組的復(fù)制而復(fù)制,各種基因輸送系統(tǒng)采用的術(shù)語與該領(lǐng)域的技術(shù)進(jìn)展步調(diào)一致,并進(jìn)一步區(qū)分不同的方法和細(xì)胞類型。

　　轉(zhuǎn)染技術(shù)作為一種分析工具，可將外源基因?qū)胝婧思?xì)胞，有助于機(jī)體表征遺傳、蛋白質(zhì)合成、細(xì)胞生長和發(fā)育等功能的研究。慢病毒載體，腺病毒載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等病毒傳遞系統(tǒng)可用于轉(zhuǎn)運(yùn)DNA或RNA到目的細(xì)胞中。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)整合效率高，但存在一定的生物安全隱患，且轉(zhuǎn)染的準(zhǔn)備程序比較復(fù)雜，對細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性。此外，在進(jìn)行病毒轉(zhuǎn)染之前，需要考慮幾種限制因素，如病毒載體的裂解性質(zhì)，細(xì)胞系包裝和宿主細(xì)胞特異性等。

　　理想的核酸轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該是高效、安全、簡單、省時(shí)和經(jīng)濟(jì)的。隨著轉(zhuǎn)染方法的不斷發(fā)展以及轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)日益增加，選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑以達(dá)到轉(zhuǎn)染效率顯得尤為重要。在考慮合適的真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑時(shí)，應(yīng)首先確定測定的細(xì)胞類型和培養(yǎng)條件。罕見的細(xì)胞培養(yǎng)，如神經(jīng)元和原代細(xì)胞等通常難以轉(zhuǎn)染，因此可能需要能促進(jìn)轉(zhuǎn)染的試劑。此外，在選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑之前，還應(yīng)該考慮試劑水平和細(xì)胞毒性參數(shù)。